Hua

Hei ine i te maha o nga metabolites o te 5-fluorouracil (5-FU) me nga nucleotides monophosphate endogenous e rua, i hangaia e matou he tikanga taketake i runga i te chromatography wai-tandem spectrometry papatipu (LC-MS/MS).I whakaaetia e tenei whakamatautau te whakatau o: (i) te hanga intracellular o 5-fluoro-2′-deoxyuridine-5′-monophosphate (5-FdUMP) mai i te 5-FU ranei 5-fluoro-2′-deoxyuridine (5-FdUrd) , (ii) te paanga o te 5-FdUMP kukū ki runga i te 2′-deoxyuridine-5′-monophosphate (dUMP)/thymidine-5′-monophosphate (TMP) i roto i roto i te pūtau, me te (iii) te rahinga huna o te 5-FdUMP me 5-FU mai i nga pūtau whakatipu tangata na nga kaikawe ABC.I raro i o maatau tikanga whakamatautau, ka whakakorohia nga pūtau ki te 5-FU, 5-FUrd ranei.I muri iho, ka whakahekehia nga pūmua pūtau e te methanol.Ko tenei tukanga i whakarato i te whakaora tangohanga teitei.I tua atu, ki te ine i te 5-FU me te 5-FdUMP te hunanga mai i nga pūtau, i mahia e matou te ine i enei ngota i roto i te tikanga tikanga.I werohia tikatia te hunga pāpāho (5-FU) i raro ranei i te tangohanga wahanga totoka ma te whakamahi kariri tangohanga Waki ​​Oasis (5-FdUMP).Ko te wehenga o nga tātari i mahia i runga i te dC18 Atlantis 3.5 μm, (100 mm × 2.1 mm id) tīwae me te aratau isocratic ma te whakamahi i te ammonium formate buffer/methanol/wai (5/5/90, v/v) hei wahanga pūkoro.Ko te wa oma kaore i neke ake i te 6.2 min.I katote nga tātari i roto i te atanga electrospray i raro i te aratau katote kino.I whakamanahia e matou te tikanga i runga i te awhe 2.5-150 ng mL −1 e ai ki nga huinga.He iti ake i te 10% te rereketanga o roto me te whakamatautau i roto i nga ra e whitu.He pūmau katoa nga pūhui i roto i nga pūtau, i roto ranei i te tikanga ahurea ina rongoa nga tauira ki te −20 °C mo te rua wiki neke atu, ka mutu e toru nga huringa huka-rewa.Karekau he awenga matrix i kitea i roto i nga panui e rua.